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    北京pk10冠军绝杀一码:徕卡显微镜荧光染料

    2014-10-15  发布者:admin 

     在荧光显微镜的基本原理是细胞成分有荧光剂的帮助的非常具体的可视化。这可以是荧光蛋白 - 例如绿色荧光蛋白 - 基因与感兴趣的蛋白质。如果克隆是不可能的 - 例如组织学标本中 - 这是需要使用其他技术,如免疫荧光染色来可视化目的蛋白质。用于此目的的抗体的利用,这是可以直接或间接地连接到不同的荧光染料和结合到适当的目标结构。此外,与荧光染料的徕卡显微镜的帮助下,不仅限于蛋白,但它也提供了机会染色核酸,多糖和其他结构??梢约觳馍踔练巧镂镏?,如钙离子。本文介绍了常用的荧光剂。


    荧光免疫

    在荧光显微镜有两种方式来可视化你的目标蛋白。无论是与一个固有荧光信号的帮助下 - 这意味着通过克隆,因此基因连接的荧光蛋白与靶蛋白?;蚪柚獗昙堑奶匾煨越岷系礁行巳さ牡鞍字实目固?。对于一些生物的问题是比较有用的,甚至需要进行后者。在组织学样品的情况下,例如,它不可能使用的,因为在一般的样品被从其中不持有任何荧光蛋白的生物来源的荧光蛋白。此外,如果一个有效的抗体可用,免疫比荧光蛋白技术快得多,是你要克隆的兴趣和转染的DNA的基因插入到适当的细胞。荧光蛋白的另一个缺点在于身为蛋白质本身的性质。有了它,它们具有可导致功能障碍或误解关于感兴趣的附着蛋白的细胞内特定蛋白质性的特点。然而,应当认为,使用荧光蛋白是通常选择的方法来观察活细胞。 

    免疫荧光法利用抗体与其抗原的非常特异性结合亲和力的。这可以有两种不同的外观。最简单的方法是使用一种被结合到感兴趣的蛋白的荧光标记的抗体。这就是所谓的直接免疫荧光。 

     

    在大多数情况下,有两种形式的抗体的使用。第一个结合靶蛋白并没有荧光标记本身(第一抗体)。但是,第二个(第二抗体),其结合第一抗体特异性带有荧光染料。这种方法被称为间接免疫荧光和具有若干优点。一方面有一个放大的效果,因为多于一个的第二抗体结合于一个第一抗体。另一方面,没有必要所有的时间标记每个抗体对您喜欢的蛋白与荧光染料而使用的商业荧光标记的第二抗体。广泛使用的荧光染料的免疫是FITC,TRITC或都提到了以下几个Alexa的Fluor®染料。

    FITC 和TRITC

    异硫氰酸荧光素(FITC)是有机荧光染料仍然在免疫荧光和流式细胞术使用。它的激发/发射峰在517分之495nm和可耦合到不同的抗体,其反应性异硫氰酸酯基,其上结合的蛋白质的氨基,巯基,咪唑基,酪氨?;螋驶陌镏?。它的基本形式 - 荧光素 - 具有332克/摩尔的摩尔质量,并经常被用来作为荧光示踪剂。 FITC(388克/摩尔),这是用于荧光显微镜和服务为原点进行进一步的荧光染料类的AlexaFluor®488第一的染料之一。其荧光活性是由于其大的共轭芳族电子系统,它是由光的蓝色光谱激发。

    图1:果蝇胚胎发育,绿色:FITC,红色:TRITC       图2:小鼠成纤维细胞,绿色F-肌动蛋白,FITC Red:Tubulin, Cy5, 蓝色:细胞核,DAPI


    很多时候同日而语用FITC使用的染料是它的发音相似的伙伴TRITC(四甲-5(6)-isothiocyanate)。相反,FITC,TRITC不是荧光素,但罗丹明家族的衍生物。罗丹明也有一个大的共轭芳族电子系统,是什么导致了它们的荧光行为。相反,FITC,TRITC(478克/摩尔)为激发光在绿色光谱,最大在550nm处。其最大发射是在撒谎,在573纳米。键合到蛋白质(如抗体)也基于反应性异硫氰酸酯基团。 

    即使FITC和TRITC仍然在使用,它们是相当弱的荧光染料和不推荐用于本领域显微镜的状态。他们的利润是根据自己的经济代价。


    花青

    这种相对小集合荧光染料是来自菁这也是起源于他们的名字的Cy2,Cy3,Cy5和Cy7标记。所有的人都可以通过它们的反应性基团被连接到核酸或蛋白质。对于蛋白质性标签使用的马来酰亚胺基团,例如。有趣的 - 有关荧光 - Cy5的是其电子周围敏感。这可以用于酶测定。的附连蛋白导致正的或负的变化中的荧光发射的构象变化。此外Cy3和Cy5可用于FRET实验?;ㄇ嗳玖鲜潜冉侠系挠馊玖虾鸵谰萜渌馊玖暇哂懈慕牧炼?,耐光性,量子产率等。

    Alexa Fluor®染料

    Alexa Fluor®染料这是经常使用的荧光显微镜一大群的带负电荷的亲水性和荧光染料。他们的称谓可追溯到它的发明者理查德·保罗·豪格兰谁任命他的儿子亚历克斯毕浩然后的染料。该标签是分子探针(生命技术的附属公司)的注册商标。此外,各激光的激发波长中提到他们的标签。例如在非常广泛使用的AlexaFluor®488具有最大激发,在493纳米,它允许励磁用标准488nm的激光。 Alexa Fluor®488具有发射最大值在519纳米。与此特征,Alexa Fluor®488具有非常相似的性质,以FITC。虽然Alexa Fluor®488是荧光素衍生物,而相比之下,FITC它具有更好的稳定性,亮度和较低的pH敏感性。所有的AlexaFluor®染料是不同的基本的荧光物质如荧光素,香豆素类,花青或罗丹明(如Alexa Fluor®546,Alexa Fluor®633)的磺化形式。它们的摩尔质量范围为410至1400克/摩尔。

    图3:转基因小鼠胚胎,interlimb体节,在10.5天的转基因小鼠胚胎的五interlimb体节:EpaxialMyf5绿色荧光蛋白;免疫染色的GFP-Alexa的488;沾上结蛋白,Cy3的胚胎肌纤维,细胞核被发现用Hoechst大小从上到下:3.5毫米(一),800微米(B)。奥莉乔瑞,Cellules Souches与发展协会,巴斯德研究所,法国巴黎和IGBMC,IGBMC成像中心:礼貌


    图4:小鼠成纤维细胞,绿色F-肌动蛋白,FITC红:微管蛋白,Cy5 ,蓝色:细胞核的DAPI。君特·吉斯博士,马普医学研究所,德国海德堡:礼貌


    DNA染色

    荧光显微镜不仅蛋白质结构的利益,也有核酸。有时有必要通过其核的检测,以确定细胞的确切位置或数量。一种最常见的DNA污斑是DAPI(4',6 - 二脒-2 - 苯基吲哚),其结合在DNA双螺旋结构的丰富的区域。 DAPI荧光强度增加,如果附着的DNA相比,其未绑定状态。据兴奋紫外光,最大的358纳米。发射谱很广,在461 nm的峰值。弱荧光,也可用于RNA结合检测。在这种情况下,发射偏移到500nm。有趣的是,DAPI是能够渗透完整的细胞膜。因此,它可以在固定,以及在活体细胞中。 

    第二个广泛使用的DNA染色方法是染料Hoechst公司,它最初是由化工企业赫斯特公司生产的家庭。赫斯特33258,赫斯特33342,和赫斯特34580顷双 - benzimides与嵌入倾向的AT丰富的地区,于是后者不使用非常频繁。类似DAPI它们通过紫外光激发而具有发射最大值在455纳米,它被移动到510-540毫微米以未结合状态。 Hoechst的污渍也被细胞渗透性,可以在固定和活细胞,因此可以使用。的差异,以DAPI是其较低的毒性。

    一种膜防渗的DNA染色是丙啶,碘化物。它,它通常用于在细胞培养活细胞和死细胞之间进行区分,因为它不能老是进入完整细胞。 Propidium-碘化物也嵌入剂,但没有约束力的偏好不同的碱基。在核酸结合的状态下,其最大激发是在538纳米。最高排放为617纳米。未绑定丙啶,碘激发和发射最大值被移到较低的波长和强度较低。它也可以结合RNA,而不改变它的荧光特性。区分的RNA的DNA,需要使用适当的核酸酶。 

    染料,其能够使以前无操纵的DNA和RNA之间的差是吖啶橙。它的激发/发射最大对在DNA的破解版502纳米/525纳米和转向460纳米/650纳米的绑定RNA的状态。此外,它能够进入酸性隔室等溶酶体。有阳离子染料被质子化。在此酸性吖啶橙周围被光在蓝色光谱激发的,而发射是最强的橙色区域。由于细胞凋亡有很多吞没酸性车厢这使得它经常被用来标记那些类型的细胞。


    舱和细胞器的特定染料

    图5:Pukinje细胞,小鼠小脑皮质的三重标记矢状窦旁一节。红色:抗钙结合蛋白-D28K/ Cy3的,绿色环保:抗GFAP/ Cy5的,蓝色:赫斯特33258

    图6:牛肺血管内皮细胞。红色:线粒体标记MitoTracker®红CMXRos,绿色F-肌动蛋白标记的绿色荧光BODIPY®FL phallacidin,蓝色:DAPI标记的细胞核。使用3D盲解卷积此图像增强

    在荧光显微镜中是经常合理染色细胞区室像溶酶体或内体和细胞器像线粒体。为此,有将在本节中提到的具体可用染料的调色板。

    一种公知的方法来观察线粒体是MitoTracker®的利用率。这是一种细胞渗透性染料有轻微巯基反应性氯部分。有了它,就可以通过共价键与半胱氨酸残基的游离巯基反应结合到基质蛋白。 MitoTracker®存在以不同的颜色和修改(第表1)和是Molecular Probes公司的一个注册商标。相反,如罗丹明123或tetramethylrosamine传统线粒体特定污渍,MitoTracker®不破坏膜电位与固定剂后冲了出去。

    根据线粒体的污渍也有染料标记的酸性区室像溶酶体被称为LysoTracker。这些都是链接到荧光膜渗透性弱碱性。很可能这些碱有,因为质子的酸性区室的亲和力。 LysoTrackers也以不同的颜色(S表1)可用。

    一个可比较舱溶酶体是像酿酒酵母真菌液泡。此膜的封闭空间是酸性性质也??墒踊谟庀晕⒕抵械囊恢址椒ㄊ鞘褂帽揭蚁┗玖系鹊髌?-64®或FM5-95®。

    当涉及到蛋白分泌实验,内质网(ER)是一种特殊的兴趣。一个经典的染料来染色这个车厢是DiOC6(3)。它有一个偏好的急诊室,但仍绑定到其他膜像线粒体。另一种方法特异性染色质网是用ER-跟踪器一样ER-跟踪绿色和红色。两者都是它们与格列本脲肾上腺素类染料 - 一个sulfonylurease - 它结合到ATP敏感性钾通道的完全驻留在ER膜。 BODIPY(硼 - 二吡咯亚甲基)描述了一组相对pH值不敏感的染料几乎都是水不溶性的。这并没有使他们的蛋白质标记,但脂质和膜标签的一个很好的工具。

    相邻的车厢内质网 - 高尔基appararatus - 可以用荧光神经酰胺类似物如NBD C6-神经酰胺和BODIPY FL C5-神经酰胺。神经酰胺是鞘脂的高度富集于高尔基体。

    随着进一步基于脂质染料的帮助有可能弄脏特殊膜区域样脂质筏。这些富含胆固醇的结构域可以通过使用NBD-6胆固醇或NBP-12胆固醇除其他(Avanti极性脂质)被可视化。 


    除了使用特殊的非proteinacous荧光染料标记的细胞区室,也可以染色的与蛋白质的帮助下与偏好在小区的不同位置感兴趣的区域。这些蛋白质可以被链接到的荧光染料和可视化的荧光显微镜。一个示例为这样一种方法是麦胚凝集素(WGA)的用法,其特异性地结合于唾液酸和N-乙酰葡糖氨基存在于质膜上。 WGA被耦合到荧光染料。与之质膜可以被观察到。


    离子成像

    在神经元的研究中,基因的活性或细胞运动的情况下 - 例如 - 它是感兴趣了解的细胞中的离子浓度。钠,钙,氯离子或镁离子具有在许多不同的细胞事件的深刻影响。通常,离子可被捕获与荧光标记的螯合剂,当绑定到适当的离子而改变它们的光谱性质的帮助。这个原理体现在钙指标呋喃-2,吲-1,荧光 - 3,荧光4和钙绿,例如。 

    钠检测,SBFI(钠结合benzofurzanisophthalate)或绿色钠是常用的。 PBFI(钾结合苯并呋喃间苯二甲酸)检测钾离子。 

    有趣的是也有基于蛋白质的钙指标。其中之一是基于化学发光的水母蛋白水母发光蛋白。水母发光蛋白的发光团腔肠素,分子氧和Ca2 +的相互作用导致了蓝色的光的释放 - 在荧光蛋白的发现非常突出的机构。


    荧光染料和它们的激发和发射波长的峰

    所有上面提到的染料列于下表中。另外附加的荧光染料,其激发和发射波长峰相提并论。

    Table 1

    荧光染料样品

    激发

    发射

    Indo-1, Ca saturated

    331 nm

    404 nm

    Indo-1 Ca2+

    346 nm

    404 nm

    Cascade Blue BSA pH 7.0

    401 nm

    419 nm

    Cascade Blue

    398 nm

    420 nm

    LysoTracker Blue

    373 nm

    421 nm

    Alexa 405

    401 nm

    421 nm

    LysoSensor Blue pH 5.0

    374 nm

    424 nm

    LysoSensor Blue

    374 nm

    424 nm

    DyLight 405

    399 nm

    434 nm

    DyLight 350

    332 nm

    435 nm

    BFP (Blue Fluorescent Protein)

    380 nm

    439 nm

    Alexa 350

    343 nm

    441 nm

    7-Amino-4-methylcoumarin pH 7.0

    346 nm

    442 nm

    Amino Coumarin

    345 nm

    442 nm

    AMCA conjugate

    347 nm

    444 nm

    Coumarin

    360 nm

    447 nm

    7-Hydroxy-4-methylcoumarin

    360 nm

    447 nm

    7-Hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0

    361 nm

    448 nm

    6,8-Difluoro-7-hydroxy-4-methylcoumarin pH 9.0

    358 nm

    450 nm

    Hoechst 33342

    352 nm

    455 nm

    Pacific Blue

    404 nm

    455 nm

    Hoechst 33258

    352 nm

    455 nm

    Hoechst 33258-DNA

    352 nm

    455 nm

    Pacific Blue antibody conjugate pH 8.0

    404 nm

    455 nm

    PO-PRO-1

    434 nm

    457 nm

    PO-PRO-1-DNA

    435 nm

    457 nm

    POPO-1

    433 nm

    457 nm

    POPO-1-DNA

    433 nm

    458 nm

    DAPI-DNA

    359 nm

    461 nm

    DAPI

    358 nm

    463 nm

    Marina Blue

    362 nm

    464 nm

    SYTOX Blue-DNA

    445 nm

    470 nm

    CFP (Cyan Fluorescent Protein)

    434 nm

    474 nm

    eCFP (Enhanced Cyan Fluorescent Protein)

    437 nm

    476 nm

    1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid (1,8-ANS)

    375 nm

    479 nm

    Indo-1, Ca free

    346 nm

    479 nm

    1,8-ANS (1-Anilinonaphthalene-8-sulfonic acid)

    375 nm

    480 nm

    BO-PRO-1-DNA

    462 nm

    482 nm

    BOPRO-1

    462 nm

    482 nm

    BOBO-1-DNA

    461 nm

    484 nm

    SYTO 45-DNA

    451 nm

    486 nm

    evoglow-Pp1

    448 nm

    495 nm

    evoglow-Bs1

    448 nm

    496 nm

    evoglow-Bs2

    448 nm

    496 nm

    Auramine O

    431 nm

    501 nm

    DiO

    487 nm

    501 nm

    LysoSensor Green pH 5.0

    447 nm

    502 nm

    Cy 2

    489 nm

    503 nm

    LysoSensor Green

    447 nm

    504 nm

    Fura-2, high Ca

    336 nm

    504 nm

    Fura-2 Ca2+sup>

    336 nm

    505 nm

    SYTO 13-DNA

    488 nm

    506 nm

    YO-PRO-1-DNA

    491 nm

    507 nm

    YOYO-1-DNA

    491 nm

    509 nm

    eGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)

    488 nm

    509 nm

    LysoTracker Green

    503 nm

    509 nm

    GFP (S65T)

    489 nm

    509 nm

    BODIPY FL, MeOH

    502 nm

    511 nm

    Sapphire

    396 nm

    511 nm

    BODIPY FL conjugate

    503 nm

    512 nm

    MitoTracker Green

    490 nm

    512 nm

    MitoTracker Green FM, MeOH

    490 nm

    512 nm

    Fluorescein 0.1 M NaOH

    493 nm

    513 nm

    Calcein pH 9.0

    494 nm

    514 nm

    Fluorescein pH 9.0

    490 nm

    514 nm

    Calcein

    493 nm

    514 nm

    Fura-2, no Ca

    367 nm

    515 nm

    Fluo-4

    494 nm

    516 nm

    FDA

    495 nm

    517 nm

    DTAF

    495 nm

    517 nm

    Fluorescein

    495 nm

    517 nm

    Fluorescein antibody conjugate pH 8.0

    493 nm

    517 nm

    CFDA

    495 nm

    517 nm

    FITC

    495 nm

    517 nm

    Alexa Fluor 488 hydrazide-water

    493 nm

    518 nm

    DyLight 488

    493 nm

    518 nm

    5-FAM pH 9.0

    492 nm

    518 nm

    FITC antibody conjugate pH 8.0

    495 nm

    519 nm

    Alexa 488

    493 nm

    520 nm

    Rhodamine 110

    497 nm

    520 nm

    Rhodamine 110 pH 7.0

    497 nm

    520 nm

    Acridine Orange

    431 nm

    520 nm

    Alexa Fluor 488 antibody conjugate pH 8.0

    499 nm

    520 nm

    BCECF pH 5.5

    485 nm

    521 nm

    PicoGreendsDNA quantitation reagent

    502 nm

    522 nm

    SYBR Green I

    498 nm

    522 nm

    Rhodaminen Green pH 7.0

    497 nm

    523 nm

    CyQUANT GR-DNA

    502 nm

    523 nm

    NeuroTrace 500/525, green fluorescent Nissl stain-RNA

    497 nm

    524 nm

    DansylCadaverine

    335 nm

    524 nm

    Rhodol Green antibody conjugate pH 8.0

    499 nm

    524 nm

    Fluoro-Emerald

    495 nm

    524 nm

    Nissl

    497 nm

    524 nm

    Fluorescein dextran pH 8.0

    501 nm

    524 nm

    Rhodamine Green

    497 nm

    524 nm

    5-(and-6)-Carboxy-2', 7'-dichlorofluorescein pH 9.0

    504 nm

    525 nm

    DansylCadaverine, MeOH

    335 nm

    526 nm

    eYFP (Enhanced Yellow Fluorescent Protein)

    514 nm

    526 nm

    Oregon Green 488

    498 nm

    526 nm

    Oregon Green 488 antibody conjugate pH 8.0

    498 nm

    526 nm

    Fluo-3

    506 nm

    527 nm

    BCECF pH 9.0

    501 nm

    527 nm

    SBFI-Na+

    336 nm

    527 nm

    Fluo-3 Ca2+

    506 nm

    527 nm

    Rhodamine 123, MeOH

    507 nm

    529 nm

    FlAsH

    509 nm

    529 nm

    Calcium Green-1 Ca2+

    506 nm

    529 nm

    Magnesium Green

    507 nm

    530 nm

    DM-NERF pH 4.0

    493 nm

    530 nm

    Calcium Green

    506 nm

    530 nm

    Citrine

    515 nm

    530 nm

    LysoSensor Yellow pH 9.0

    335 nm

    530 nm

    TO-PRO-1-DNA

    515 nm

    531 nm

    Magnesium Green Mg2+

    507 nm

    531 nm

    Sodium Green Na+

    507 nm

    531 nm

    TOTO-1-DNA

    514 nm

    531 nm

    Oregon Green 514

    512 nm

    532 nm

    Oregon Green 514 antibody conjugate pH 8.0

    513 nm

    533 nm

    NBD-X

    466 nm

    534 nm

    DM-NERF pH 7.0

    509 nm

    537 nm

    NBD-X, MeOH

    467 nm

    538 nm

    CI-NERF pH 6.0

    513 nm

    538 nm

    Alexa 430

    431 nm

    540 nm

    Alexa Fluor 430 antibody conjugate pH 7.2

    431 nm

    540 nm

    CI-NERF pH 2.5

    504 nm

    541 nm

    Lucifer Yellow, CH

    428 nm

    542 nm

    LysoSensor Yellow pH 3.0

    389 nm

    542 nm

    6-TET, SE pH 9.0

    521 nm

    542 nm

    Eosin antibody conjugate pH 8.0

    525 nm

    546 nm

    Eosin

    524 nm

    546 nm

    6-Carboxyrhodamine 6G pH 7.0

    526 nm

    547 nm

    6-Carboxyrhodamine 6G, hydrochloride

    525 nm

    547 nm

    Bodipy R6G SE

    528 nm

    547 nm

    BODIPY R6G, MeOH

    528 nm

    547 nm

    6 JOE

    520 nm

    548 nm

    Cascade Yellow antibody conjugate pH 8.0

    399 nm

    549 nm

    Cascade Yellow

    399 nm

    549 nm

    mBanana

    540 nm

    553 nm

    Alexa Fluor 532 antibody conjugate pH 7.2

    528 nm

    553 nm

    Alexa 532

    528 nm

    553 nm

    Erythrosin-5-isothiocyanate pH 9.0

    533 nm

    554 nm

    6-HEX, SE pH 9.0

    534 nm

    559 nm

    mOrange

    548 nm

    562 nm

    mHoneydew

    478 nm

    562 nm

    Cy 3

    549 nm

    562 nm

    Rhodamine B

    543 nm

    565 nm

    DiI

    551 nm

    565 nm

    5-TAMRA-MeOH

    543 nm

    567 nm

    Alexa 555

    553 nm

    568 nm

    Alexa Fluor 555 antibody conjugate pH 7.2

    553 nm

    568 nm

    DyLight 549

    555 nm

    569 nm

    BODIPY TMR-X, SE

    544 nm

    570 nm

    BODIPY TMR-X, MeOH

    544 nm

    570 nm

    PO-PRO-3-DNA

    539 nm

    571 nm

    PO-PRO-3

    539 nm

    571 nm

    Rhodamine

    551 nm

    573 nm

    Bodipy TMR-X conjugate

    544 nm

    573 nm

    POPO-3

    533 nm

    573 nm

    Alexa 546

    562 nm

    573 nm

    BODIPY TMR-X antibody conjugate pH 7.2

    544 nm

    573 nm

    Calcium Orange Ca2+

    549 nm

    573 nm

    TRITC

    550 nm

    573 nm

    Calcium Orange

    549 nm

    574 nm

    Rhodaminephalloidin pH 7.0

    558 nm

    575 nm

    MitoTracker Orange

    551 nm

    575 nm

    MitoTracker Orange, MeOH

    551 nm

    575 nm

    Phycoerythrin

    565 nm

    575 nm

    Magnesium Orange

    550 nm

    575 nm

    R-Phycoerythrin pH 7.5

    565 nm

    576 nm

    5-TAMRA pH 7.0

    553 nm

    576 nm

    5-TAMRA

    549 nm

    577 nm

    Rhod-2

    552 nm

    577 nm

    FM 1-43

    472 nm

    578 nm

    Rhod-2 Ca2+

    553 nm

    578 nm

    Tetramethylrhodamine antibody conjugate pH 8.0

    552 nm

    578 nm

    FM 1-43 lipid

    473 nm

    579 nm

    LOLO-1-DNA

    568 nm

    580 nm

    dTomato

    554 nm

    581 nm

    DsRed

    563 nm

    581 nm

    Dapoxyl (2-aminoethyl) sulfonamide

    372 nm

    582 nm

    Tetramethylrhodamine dextran pH 7.0

    555 nm

    582 nm

    Fluor-Ruby

    554 nm

    582 nm

    Resorufin

    571 nm

    584 nm

    Resorufin pH 9.0

    571 nm

    584 nm

    mTangerine

    568 nm

    585 nm

    LysoTracker Red

    578 nm

    589 nm

    Lissaminerhodamine

    572 nm

    590 nm

    Cy 3.5

    578 nm

    591 nm

    Rhodamine Red-X antibody conjugate pH 8.0

    573 nm

    591 nm

    Sulforhodamine 101, EtOH

    578 nm

    593 nm

    JC-1 pH 8.2

    593 nm

    595 nm

    JC-1

    592 nm

    595 nm

    mStrawberry

    575 nm

    596 nm

    MitoTracker Red

    578 nm

    599 nm

    MitoTracker Red, MeOH

    578 nm

    599 nm

    X-Rhod-1 Ca2+

    580 nm

    602 nm

    Alexa Fluor 568 antibody conjugate pH 7.2

    579 nm

    603 nm

    Alexa 568

    576 nm

    603 nm

    5-ROX pH 7.0

    578 nm

    604 nm

    5-ROX (5-Carboxy-X-rhodamine, triethylammonium salt)

    578 nm

    604 nm

    BO-PRO-3-DNA

    574 nm

    604 nm

    BOPRO-3

    574 nm

    604 nm

    BOBO-3-DNA

    570 nm

    605 nm

    Ethidium Bromide

    524 nm

    605 nm

    ReAsH

    597 nm

    608 nm

    Calcium Crimson

    589 nm

    608 nm

    Calcium Crimson Ca2+

    590 nm

    608 nm

    mRFP

    585 nm

    608 nm

    mCherry

    587 nm

    610 nm

    Texas Red-X antibody conjugate pH 7.2

    596 nm

    613 nm

    HcRed

    590 nm

    614 nm

    DyLight 594

    592 nm

    616 nm

    Ethidium homodimer-1-DNA

    528 nm

    617 nm

    Ethidiumhomodimer

    528 nm

    617 nm

    Propidium Iodide

    538 nm

    617 nm

    SYPRO Ruby

    467 nm

    618 nm

    Propidium Iodide-DNA

    538 nm

    619 nm

    Alexa 594

    590 nm

    619 nm

    BODIPY TR-X, SE

    588 nm

    621 nm

    BODIPY TR-X, MeOH

    588 nm

    621 nm

    BODIPY TR-X phallacidin pH 7.0

    590 nm

    621 nm

    Alexa Fluor 610 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2

    567 nm

    627 nm

    YO-PRO-3-DNA

    613 nm

    629 nm

    Di-8 ANEPPS

    469 nm

    630 nm

    Di-8-ANEPPS-lipid

    469 nm

    631 nm

    YOYO-3-DNA

    612 nm

    631 nm

    Nile Red-lipid

    553 nm

    636 nm

    Nile Red

    559 nm

    637 nm

    DyLight 633

    624 nm

    646 nm

    mPlum

    587 nm

    649 nm

    TO-PRO-3-DNA

    642 nm

    657 nm

    DDAO pH 9.0

    648 nm

    657 nm

    Fura Red, high Ca

    434 nm

    659 nm

    Allophycocyanin pH 7.5

    651 nm

    660 nm

    APC (allophycocyanin)

    650 nm

    660 nm

    Nile Blue, EtOH

    631 nm

    660 nm

    TOTO-3-DNA

    642 nm

    661 nm

    Cy 5

    646 nm

    664 nm

    BODIPY 650/665-X, MeOH

    646 nm

    664 nm

    Alexa Fluor 647 R-phycoerythrin streptavidin pH 7.2

    569 nm

    666 nm

    DyLight 649

    652 nm

    668 nm

    Alexa Fluor 647 antibody conjugate pH 7.2

    653 nm

    668 nm

    Alexa 647

    653 nm

    669 nm

    Fura Red Ca2+

    435 nm

    670 nm

    Atto 647

    644 nm

    670 nm

    Fura Red, low Ca

    472 nm

    673 nm

    Carboxynaphthofluorescein pH 10.0

    600 nm

    674 nm

    Alexa 660

    664 nm

    691 nm

    Alexa Fluor 660 antibody conjugate pH 7.2

    663 nm

    691 nm

    Cy 5.5

    673 nm

    692 nm

    Alexa Fluor 680 antibody conjugate pH 7.2

    679 nm

    702 nm

    Alexa 680

    679 nm

    703 nm

    DyLight 680

    678 nm

    706 nm

    Alexa Fluor 700 antibody conjugate pH 7.2

    696 nm

    719 nm

    Alexa 700

    696 nm

    720 nm

    FM 4-64, 2% CHAPS

    506 nm

    751 nm

    FM 4-64

    508 nm

    751 nm

     



    沪公网安备 31011202003519号

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